استخراج لاکتوباسیل از ماست
از ویکی خرد
استخراج لاکتوباسیل از ماست'
فهرست مندرجات |
تعاریف
باکتری:یک موجود ذره بینی است که انواع مفید و مضر دارد.
انکوباتور:دستگاهی است که می توان آن را برای دما های مختلف تنظیم کرد تا باکتری ها رشد کنند.
روغن ایمرسیون:اگر شما بخواهید لامی را با لنز 100درجه مشاهده کنید باید از روغن ایمرسون استفاده کنید.
لام:تیغکی شیشه برای مشاهده ماده زیر میکروسکوپ و......
گرم +:اگر باکتری ما گرم مثبت باشد در دیواره اش چربی ندارد.
گرم -:اگر باکتری ما گرم منفی باشد در دیواره اش چربی دارد.
رنگ آمیزی گرم :یک نوع رنگ آمیزی است برای تشخیص باکتری های گرم + و گرم-
چکیده
پزشکان همیشه توصیه می کنند که ما همیشه باید در برنامه ی غذایی خود ماست را نیز قرار دهیم زیرا ماست دارای باکتری های مفیدی از جمله لاکتوباسیل است. هدف ما از انتخاب این پروژه این بو د که دریابیم لاکتوباسیل چه فوایدی دارد و چگونه می توانیم باکتری ها را استخراج کنیم. ما برای مشاهده ی لاکتوباسیل از رنگ آمیزی گرم استفاده کردیم. برای این کار ابتدا ماست را روی لام قرار می دهیم به طوری که ماست کاملا پخش شود .سپس چند دقیقه می گذاریم تا خشک شود بعد آن را روی شعله فیکس (fix) می کنیم سپس رنگ آمیزی گرم را شروع می کنیم. ابتدا کریستال ویوله (بنفش رنگ) را روی لام می ریزیم و پس از یک دقیقه آن را شست وشو می دهیم.بعد لوگول (محلول یددار) را می ریزیم پس از یک دقیقه رنگ را خالی می کنیم.الکل یا استن (محلول رنگ بر) را اضافه کرده پس از سی ثانیه شست و شو می دهیم .سپس فوشین (قرمز رنگ) را ریخته و پس از یک دقیقه شست و شو می دهیم.سپس اگر قرمز شدند گرم منفی نامیده شده و اگر بنفش شد گرم مثبت نامیده می شود.سپس لام را زیر میکروسکوپ قرار داده و با لنز 100 و روغن ایمرسیون مشاهده می کنیم. ما برای این که لاکتوباسیل خالص به دست بیاوریم کشت مایع را شروع کردیم و برای این کار ابتدا سواپ را درون ماست کرده و وارد لوله ی کشت مایع می کنیم و آن را به هم می زنیم سپس آن را به مدت یک روز در انکوباتور قرار می دهیم . بعد از یک روز آن را برداشته و منتقل به کشت جامد می کنیم.
هدف پروژه:
-شناخت باکتری های مفید
-روش استخراج
-شناخت باکتری های ماست
روش انجام پروژه:
رنگ آمیزی گرم:
ابتدا بر روی لام مقدار کمی ماست ریخته و آن را کاملا پخش می کنیم سپس دقایقی صبر می کنیم تا کاملا خشک شود و آن را روی شعله فیکس می -کنیم سپس کریستال ویوله را (بنفش) یک دقیقه بر روی آن نگه می داریم و سپس آن را شست و شو می دهیم.در مرحله ی بعدی لوگول (محلول ید دار)را ریخته و بعد از یک دقیقه آن را خالی می کنیم. در مرحله ی بعد الکل-استن(محلول رنگ بر )را ریخته و بعد از 30 ثانیه آن را شست و شو می دهیم، اگر باکتری گرم + (+g) باشد رنگ آن بنفش و اگر گرم منفی(-g) باشد بی رنگ می شود.بعد از شست و شوی الکل ، فوشین را که قرمز رنگ است برای یک دقیقه روی لام قرار می دهیم و دوباره شست و شومی دهیم. حال اگر باکتری گرم + باشد رنگ آن بنفش و اگر گرم - باشد رنگش قرمز می شود، حالا فقط کافی است تا بر روی روغن ایمرسیون را بریزیم و آن را زیر میکروسکوپ با لنز 100 مشاهده کنیم.
کشت مایع:
ابتدا کمی ماست را درون triptic soy broth درون لوله آزمایش می ریزیم و به هم می زنیم.سپس آن را درون انکوباتور می گذاریم تاباکتری هایش رشد کنند.(اما به یاد داشته باشید که تمامی این کار ها باید در کنار شعله انجام گیرد تا باکتری های هوا وارد آن نشوند.)
کشت جامد
در کشت جامپ ما ابتدا کمی از باکتری هایی که در کشت مایع،کشت دادیم را برداشته و آن را بر روی محیط کشت جامد آرام می کشیم.(اما به یاد داشته باشید که تمامی این کار ها باید در کنار شعله انجام گیرد تا باکتری های هوا وارد آن نشوند.)سپس در آن را بسته و آن را در انکوباتور قرار می دهیم.
یافته ها و نتیجه گیری:
معلم راهنما:
خانم شهیدی
نام اعضای گروه:
مدیا خسروی.مهدیس حکاکی.پریسا علی اکبری.عسل شاکری
