تاثیر ضد باکترییایی زنجفیل
از ویکی خرد
فهرست مندرجات |
هدف
هدف ما از انتخاب این پروژه اطمینان از خاصیت ضد باکتریایی زنجفیل و افزایش احتمال به کار بردن آن به جای پاک کننده های شیمیایی است.در اتخاب این پروژه این سوال برای ما مطرح شد که: آیا مواد گیاهی مانند زنجفیل خاصیت ضد باکتریایی دارند؟
مراحل انجام آزمایش
1)کشت در محیط مایع 2)کشت در محیط کشت جامد به صورت چمنی:
استفاده از دیسک های آغشته به زنجفیل و مشاهده تاثیر آن
ایجاد چاله در محیط کشت
3)رقیق سازی باکتری و کشت آن در محیط کشت جامد به صورت چمنی و در نهایت شمارش دقیق باکتری ها و مشاهده تاثیر آن 4)رسم نمودار و جدول و تفسیر نتایج 5)نتیجه گیری نهایی
کشت در محیط مایع
آغشته کردن سواپ به محل مورد نظر: دهان،پوست دست، پوست سر
قرار دادن سواپ در محیط کشت مایع
قرار دادن محیط کشت مایع در انکوباتور به مدت 24 ساعت در دمای بدن(37درجه)
- تمام مراحل کشت برای جلوگیری از خطا در آزمایش در کنار چراغ الکلی انجام می شود
مشاهده تاثیر
تقسیم پلیت ها به 4 بخش مساوی___ شمارش کلونی های باکتری در یک بخش ____ 4 برابر کردن تعداد انها ____ مقایسه تعداد کلونی ها در محیط کشت جامد تست و شاهد برای هر نوع باکتری ( پوست ، دهان ، پوست سر )
این ازمایش یک بار با عصاره زنجفیل تازه و یکبار با عصاره زنجفیل خشک انجام شد عصاره زنجفیل تازه تاثیر بیشتری داشت.
کشت در محیط کشت جامد
آغشته کردن سطح محیط کشت جامد به باکتری های مورد نظر توسط سواپ به صورت چمنی(حرکت دادن سواپ روی محیط کشت جامد عمودی و افقی)
قرار دادن محیط کشت جامددر انکوباتور به مدت 24 ساعت در دمای بدن(37درجه)
استفاده از دیسک های آغشته به زنجفیل
قرار دادن 4 دیسک آغشته به عصاره زنجفیل در 4 قسمت محیط کشت
مشاهده محیط کشت بعد از 1 هفته و بررسی تاثیر زنجفیل بر رشد باکتری ها(اندازه گیری قطر هاله ی دور هر یک که نشان دهنده میزان نسبی تاثیر است.) در این آزمایش محیط کشت های شاهد نیز قرار دادیم.
ایجاد چاله در محیط کشت
انجام مراحل قبل ولی در قسمت نهایی به جای دیسک،در وسط محیط کشت جامد چاله ای ایجاد کرده و در آن یک قطره عصاره زنجفیل ریختیم
استفاده از زنجفیل در ترکیبات محیط کشت
در12 لوله آزمایش (هرنوع باکتری، 3 لوله آزمایش ) 9 سی سی آب ریختیم و سرش را با پنبه پوشاندیم و آنها را جوشاندیم .
در 3لوله اول از هر 3 نوع باکتری 1 سی سی از محیط کشت مایع برداشته و در آنها ریختیم .(رقت0.1)
از هر 3 لوله اول 1 سی سی باکتری برداشته ودر 3لوله دوم ریختیم .(رقت0.01)
از هر 3 لوله دوم 1 سی سی باکتری برداشته و در 3 لوله سوم ریختیم.(رقت0.001)
آزمایش دوم
از هر 3 لوله سوم (باکتری رقیق سازی شده با دقت 0.001) یک قطره باکتری برداشته و درمحیط های کشت تست و شاهد ریخته و با میله شیشه ای تمام سطح محیط کشت را اغشته کردیم .
پلیت ها را 24 ساعت دردمای (37) درانکوباتور گذاشتیم .
محیط کشت تست
تعریف : به محیط کشتی که همراه با ماده مورد بررسی(عصاره زنجفیل ) تهیه شده باشد محیط کشت جامد تست میگویند.
درست کردن محیط کشت جامد تست 20 سی سی آب + 30 سی سی عصاره زنجفیل+ 2.6 گرم پودرمحیط کشت جامد____
_____ مخلوط کردن _____ گذاشتن درپوش پنبه ای _____ جوشاندن محلول به دست امده _____ پایین اوردن اندک دمای محلول ____ ریختن محلول در پلیت .
تفسیر نتایج
آزمایش هایی که با قرار دادن دیسک زنجفیلی و ایجاد چاله در محیط کشت انجام شد تاثیر مورد نظر را نداشت به همین دلیل در آزمایش های بعدی از عصاره ی زنجفیل در تر کیبات محیط کشت استفاده کردیم.
در نهایت به این نتیجه رسیدیم که زنجفیل باعث کشته شدن باکتری ها نمی شود بلکه رشد و فعالیت آن ها را تا حد چشم گیری کاهش می دهد.
منابع
سایت بیوتکنولوژی(زیست فناوری) کتاب 101 آزمایش زیست شناسی
اعضای گروه
مریم اکرمی
نیکتا مشکی زاد
نیوشا امامی نژاد
معلم راهنما
�سرکار خانم شهیدی